Penetapan Kadar Sulfatmetoksazol dan Trimetoprin dalam Sediaan Tablet dengan Nama Dagang dan Generik Secara Simultan dengan Metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)

Pendahuluan

Sulfametoksazol dan trimetoprin adalah obat antibiotik yang sering digunakan dalam kombinasi untuk mengobati infeksi bakteri. Penetapan kadar kedua senyawa ini dalam sediaan tablet penting untuk memastikan dosis yang tepat dan kualitas obat, baik untuk produk dengan nama dagang maupun generik. Metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) adalah teknik yang ideal untuk analisis simultan karena kemampuannya dalam memisahkan dan mengukur beberapa senyawa dalam satu sampel dengan akurasi tinggi.

Tujuan Penelitian

1. Menentukan kadar sulfametoksazol dan trimetoprin dalam sediaan tablet menggunakan metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT).
2. Memastikan kadar kedua senyawa sesuai dengan spesifikasi yang ditetapkan untuk produk dengan nama dagang dan generik.

Metodologi

Bahan dan Reagen

• Tablet yang mengandung sulfametoksazol dan trimetoprin (baik dengan nama dagang maupun generik)
• Larutan standar sulfametoksazol dan trimetoprin murni
• Pelarut: metanol, air, atau campuran sesuai kebutuhan
• Fase bergerak (mobile phase): campuran air dan pelarut organik (misalnya, asetonitril) dengan buffer pH sesuai

Alat

• Sistem kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC)
• Kolom kromatografi (misalnya, kolom C18)
• Injector sampel
• Detektor UV (biasanya pada panjang gelombang sekitar 270 nm untuk sulfametoksazol dan 280 nm untuk trimetoprin)
• Gelas ukur
• Pipet volumetrik
• Filter kertas saring

Prosedur

1. Persiapan Larutan Standar:
   • Timbang sejumlah sulfametoksazol dan trimetoprin murni dan larutkan dalam pelarut yang sesuai untuk membuat larutan stok dengan konsentrasi yang diketahui.
   • Siapkan beberapa larutan standar dengan konsentrasi yang berbeda untuk masing-masing senyawa guna membuat kurva kalibrasi.
2. Persiapan Sampel Tablet:
   • Hancurkan sejumlah tablet yang mengandung sulfametoksazol dan trimetoprin menjadi serbuk halus menggunakan mortir dan alu.
   • Timbang sejumlah serbuk tablet dan larutkan dalam pelarut yang sama dengan larutan standar (misalnya, campuran metanol dan air) untuk membuat larutan sampel.
   • Aduk atau sonikasi larutan jika perlu untuk memastikan kedua senyawa larut sepenuhnya.
   • Saring larutan untuk menghilangkan sisa partikel padat yang dapat mengganggu analisis.
3. Pengaturan Sistem KCKT:
   • Pilih kolom kromatografi yang sesuai (misalnya, kolom C18) untuk memisahkan sulfametoksazol dan trimetoprin.
   • Siapkan fase bergerak dengan komposisi yang sesuai (misalnya, campuran air dan asetonitril dengan buffer).
   • Atur detektor UV pada panjang gelombang yang sesuai untuk sulfametoksazol (misalnya, 270 nm) dan trimetoprin (misalnya, 280 nm).
4. Analisis Kromatografi:
   • Injeksikan larutan standar dan sampel ke dalam sistem KCKT.
   • Catat waktu retensi untuk sulfametoksazol dan trimetoprin dari larutan standar dan sampel.
   • Hitung konsentrasi sulfametoksazol dan trimetoprin dalam sampel berdasarkan area puncak pada kromatogram dan kurva kalibrasi.

Perhitungan

Kadar Sulfametoksazol (mg/tablet)=Konsentrasi Sulfametoksazol dari Kromatogram (mg/L)×Volume Larutan Sampel (L)Jumlah Tablet (tablet)\text{Kadar Sulfametoksazol (mg/tablet)} = \frac{\text{Konsentrasi Sulfametoksazol dari Kromatogram (mg/L)} \times \text{Volume Larutan Sampel (L)}}{\text{Jumlah Tablet (tablet)}}Kadar Sulfametoksazol (mg/tablet)=Jumlah Tablet (tablet)Konsentrasi Sulfametoksazol dari Kromatogram (mg/L)×Volume Larutan Sampel (L)​ Kadar Trimetoprin (mg/tablet)=Konsentrasi Trimetoprin dari Kromatogram (mg/L)×Volume Larutan Sampel (L)Jumlah Tablet (tablet)\text{Kadar Trimetoprin (mg/tablet)} = \frac{\text{Konsentrasi Trimetoprin dari Kromatogram (mg/L)} \times \text{Volume Larutan Sampel (L)}}{\text{Jumlah Tablet (tablet)}}Kadar Trimetoprin (mg/tablet)=Jumlah Tablet (tablet)Konsentrasi Trimetoprin dari Kromatogram (mg/L)×Volume Larutan Sampel (L)​

Validasi Metode

Akurasi dan Presisi

• Lakukan pengulangan pengujian pada sampel yang sama untuk memastikan konsistensi hasil.
• Bandingkan hasil dengan nilai yang diharapkan atau metode referensi.

Linearitas

• Verifikasi linearitas kurva kalibrasi dalam rentang konsentrasi sulfametoksazol dan trimetoprin yang relevan.

Spesifisitas

• Pastikan metode ini dapat membedakan sulfametoksazol dan trimetoprin dari komponen lain dalam tablet.

Batas Deteksi dan Kuantisasi

• Tentukan batas deteksi (LOD) dan batas kuantisasi (LOQ) untuk metode ini.

Hasil dan Diskusi

1. Penentuan Kadar Sulfametoksazol dan Trimetoprin:
   • Diskusikan hasil pengukuran kadar sulfametoksazol dan trimetoprin dalam sediaan tablet.
   • Bandingkan hasil dengan spesifikasi atau regulasi yang ditetapkan untuk memastikan konsistensi dan kualitas produk.
2. Analisis Hasil:
   • Evaluasi apakah kadar sulfametoksazol dan trimetoprin dalam tablet sesuai dengan batas yang ditetapkan oleh badan pengawas obat.
   • Diskusikan apakah hasil menunjukkan perbedaan signifikan antara tablet yang diuji dan spesifikasi produk.

Kesimpulan

Metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) adalah teknik yang efektif untuk penetapan kadar sulfametoksazol dan trimetoprin dalam sediaan tablet secara simultan. Dengan validasi yang tepat, metode ini dapat digunakan untuk memastikan kualitas dan dosis yang sesuai dari tablet yang mengandung kedua senyawa tersebut.